河豚毒素的提取和检测实验室制备方法
第二，在室温下将合并的滤液与5 倍体积丙酮一起搅拌，用稀氨水调节pH 值6 . 5 ～7 ，搅拌1 小时，使悬浮物沉降至少4 小时，离心，每千克原料组织得135 毫升的残留物再悬浮于水中。用固体碳酸钠调节州值到6 . 5 士0 . 05 ，在室温下搅拌1 小时，过滤，用少量水再提取残留物，合并可溶性部分。
第三，在PH值6 . 5 时将毒素溶液加到CS-101 离子交换树脂柱（钠型），每小时每体积树脂约加入1/5 体积的溶液。这时流出的液体的PH值约7 . 5 ，毒素加入后，用约2 . 5 倍体积的水洗柱，然后以同样的流量用1 摩尔／升醋酸洗脱。在声值4～6 . 5 之间洗脱毒素。合并级分，经冷冻干燥缩小毒素级分的体积。
第四，加入A-40 离子交换树脂（羟基型）于粘稠浓缩物直到PH值为7 士0 . 05 。过滤除去树脂，用水洗柱，以每小时每体积树脂流出体积约为1/20 体积的速率，将合并的可溶性级分，再上到XE-89 树脂柱，毒素上柱后，以每小时每体积树脂约1/10 体积的速率，用4 倍体积的水洗柱。
第五，以每小时每体积树脂1/10 体积的速率，用0 . 08 摩尔／升醋酸洗脱XE - 89 柱，在PH值4 . 1～6 . 1 之间洗脱这种毒素，冷冻干燥，重新构成15000 鼠单位／毫升，用羟基型A - 40 树脂调节PH值6～6 . 2 （以0 . 05 毫升／克剂量腹腔内注射，在2 .5 分钟内毒杀1 只白鼠的毒素溶液，含有5 鼠单位）离心，也用上述方法洗树脂。用碳酸钠将合并溶液的声值调节到8 . 2 ，室温下使其沉淀24 小时。离心，用少量水洗涤沉淀。
第六，在pH 值4 . 8 ～5 的条件下，将沉淀的毒素溶解于少量的稀醋酸中。离心不溶性物质，用稀碳酸钠调节上清液的声值到7 ，如果需要，就用毒素结晶播种晶种，继续加碳酸钠到州值8 . 2 。离心形成的结晶，用少量水洗涤。重复结晶3～4 次，能得到组织存在的毒素的58 % ，每毫克干固体的毒性为3 050 鼠单位。
水产养殖网版权声明：所有信息均来自用户提供或网络收集，本站不担保信息的真实性、准确性和合法性。若发现企业、产品信息有误，请及时联系纠错。
