脑膜炎败血黄杆菌引起牛蛙发病一例
福建漳州诏安县一牛蛙养殖场，土池浅水养殖牛蛙（如图1），平均每个池塘15~20平方米，放养密度100~120只/ 平方米。
2012年3月份开始上料以后就逐渐有发病，初期主要是内脏出现“套肠”，当时用抗生素后死亡下降，但没有根治，之后出现白内障、歪头、烂头、打转等症状。死亡时四脚伸直，身体僵硬。
2012年8月13日到场调查，在池塘中见大量歪头、烂头的牛蛙（见图2、图3），从塘中分别取出2只歪头、2只烂头以及2只无明显疾病症状的牛蛙。外观歪头的牛蛙患有白内障（见图4），解剖见牛蛙具有“套肠”症状（见图5），其中烂头的牛蛙腹腔有大量腹水（见图6）。两只正常牛蛙无明显病变。分别从所取牛蛙的脑、肝脏、心脏、肌肉以及腹水中接种，普通营养琼脂进行细菌分离培养，并取肝、脾、肾、脑、肠和眼等组织分别用95%酒精和波恩氏固定液固定进行病毒检测和组织病理切片观察。
结果：从歪头的牛蛙（NW-1）和烂头的牛蛙（NW-3）中分离出两株细菌（见图7），经过16S rDNA测序鉴定都为脑膜炎败血黄杆菌（见图8），病毒检测结果显示，所采6只牛蛙的组织（见图9），PCR检测均能扩增出与预期片段大小（蛙虹彩病毒检测引物为545bp）相符的目的片段，将目的片段纯化后测序，序列经NCBI比对，其与GenBank中蛙虹彩病毒序列同源性为99.4%，因此可判定牛蛙感染蛙虹彩病毒。组织病理切片观察显示肝脏严重水变性（见图10），肾脏肾小管肿胀（见图11），其它组织均正常。
分析：1、脑膜炎败血黄杆菌也称为脑膜脓毒性金黄杆菌，可以引起人类脑膜炎等疾病，在蛙类也有较多致病报告，张奇亚等（1999）在“旋游症”美国青蛙脑组织分离到该菌，周永灿等（2001）在白内障和歪脖子虎纹蛙的眼、血、肝、脑、腹水分离到该菌，陈耀明等（1994）在发病牛蛙的肝脏和腹水中分离到该菌，叶雪平等（1996）在歪脖子的牛蛙脑部分离到该菌。本病例从患病牛蛙脑部也分离到该菌，发病牛蛙具有典型的歪头、白内障、共济失调等典型的蛙脑膜炎的症状。
2、据A. Cunningham（2008）蛙感染虹彩病毒后主要表现两个发病症状：皮肤溃疡和全身性出血。本病例中所采6只牛蛙均能检测出蛙虹彩病毒，很多发病蛙头部皮肤局部脱落腐烂，因此蛙虹彩病毒在本病例中可能也起到了一定的致病作用。（利洋研究所 雷燕 戚瑞荣 利洋技术部 唐绍林提供 2015.01.29）
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