复方中草药对鱼类孢子虫病的防治试验
作者：河南信阳农业高等专科学校 田海军 林伟 屈英红
正孢子虫，原形动物门，粘孢子纲，是鱼类的主要寄生虫之一，其中的鲫鱼粘孢子虫病是异育银鲫1 龄鱼种和成鱼期间的一种严重疾病。主要危害全长在5厘米以下的鲫鱼1 龄鱼种和成鱼。常见于5－7月及10月－翌年2月。病鱼背部、鳞下或肠道肉眼可见白色胞囊。严重的可在鱼体寄生部位形成大小不一的胞囊，丧失其商品价值。常用杀灭和控制寄生虫病的鱼药有食盐、硫酸铜、硫酸亚铁、高锰酸钾、敌百虫等。这些渔药常用于浸浴鱼体、挂篓和全池泼洒。常用内服药有土霉素、噁喹酸、磺胺嘧啶和磺胺甲噁唑、氟苯尼考等环保抗生素。提倡用微生物制剂和中草药来代替抗生素。筛选的中草药有大蒜、大蒜素粉、五倍子、大黄、黄芩、黄柏、穿心莲、大青叶、苦参、板蓝根、松针叶、苦楝(子、皮)等。笔者对用楝皮、青蒿、槟榔治疗孢子虫病进行初步的探索。
一、材料与方法
1.中草药的试验材料
挑选具有杀灭鱼体上寄生孢子虫几种中草药：楝皮、青蒿、槟榔三种药材，在试验中把三种中草药以复方药液的方式进行煎熬，然后煎熬成不同浓度的复方合剂。不仅可以探究三种中草药在杀灭鲫鱼粘孢子虫的效果，同时可以找出药液最适合的治疗浓度。
2.试验鱼的准备与管理
选取规格为150厘米×100厘米×80厘米玻璃缸60只，先进行试验鱼暂养，可同时开展4 组不同浓度药物试验。暂养时水深保持在60厘米。每只缸放养不少于15尾，放养规格每尾30 克以上，定期投喂饲料。日投饲率控制在鱼体重的2%左右。视水质状况换水和排污，实行充气增氧暂养。
3.试验方法
(1)分组：分4组，每组15尾，试验组为3组，对比参照组1组(本试验主要探究中草药与孢子虫的药效关系，鱼体的大小规格一致，玻璃缸为同型号，并且水为经过杀菌消毒的相同水样，温度应为相同的室温，pH值为一样的水质)。
(2)药物试验：试验采用干楝皮、干槟榔和放过半个月以上的青蒿为材料(减少水分的干扰)，分别剪碎、熬汤，熬汤时按1克药物加500克水的比例煮沸。待汤冷却后，按0.5毫克/升、1.0毫克/升、1.5毫克/升、2.0 毫克/升、2.5 毫克/升、5.0 毫克/升浓度泼到鱼缸进行药物试验。
(3)试验流程：在每个玻璃缸(150 厘米×100 厘米×80 厘米)中盛入充分曝气的地下水2 升，控制水温26℃左右，pH 6～8。采用泼洒法将各待测药物按试验设定的浓度分别加到缸中，搅拌均匀后在每个缸中投入感染有孢子虫病的异育银鲫15 尾。试验12 小时时取活鱼的小部分鳞片，制成玻片，显微镜下观察孢子虫的存活情况，并做好记录。然后在试验24小时时取活鱼的小部分鳞片，制成玻片，显微镜下观察孢子虫的存活情况，并做好记录。然后在试验36 小时时取活鱼的小部分鳞片，制成玻片，显微镜下观察孢子虫的存活情况，并做好记录。
二、试验结果与分析
1.试验结果
各种药物使用12、24小时后肉眼观察鱼体白点发展情况，显微镜检孢子虫的异常情况。试验期间水温控制在(26±1)℃，因而不会影响鲫鱼粘孢子虫的生长和繁殖。36小时再观察合剂试验结果，当浓度为2.0毫克/升时孢子虫的生殖有较大变化，鱼体白点大部分脱落，有少量虫体生长；当浓度为2.5毫克/升时鱼体白点基本脱落，未看到活的虫体；当浓度为5.0毫克/升时鱼体白点几乎全部脱落，未看到活的虫体；其他浓度未见明显效果。在用药3天后，鱼体表面又可看到幼体孢子虫寄生，并逐渐增多长成虫体。再次使用合剂(2.5毫克/升或5.0 毫克/升浓度)，24小时后显微镜观察，没有找到1个活的虫。
杀虫率＝(对照组的孢子虫平均存活数量－试验组的孢子虫平均存活数量)/对照组的孢子虫平均存活数量×100%；
鱼死亡率＝(放鱼的数量－镜验时的鱼存活数量)/投放的鱼数量×100%。
杀虫率在20%～30%的药物浓度为最低的有效浓度，杀虫率在20%以下的药物浓度为无效浓度，达到最高杀虫率且鱼不中毒的浓度为最佳的杀虫浓度。
2.楝皮、青蒿、槟榔合剂对异育银鲫的毒性观察
本试验选用规格为30 克的健康异育银鲫做试验鱼，每缸放养15尾，共4缸。暂养1 周后，泼洒不同浓度的楝皮、青蒿、槟榔合剂，分别为0.5毫克/升、1.0毫克/升、1.5毫克/升、2.0毫克/升、2.5毫克/升、5.0毫克/升浓度，所用的楝皮、青蒿、槟榔材料及加工方法与上面药物试验时类同。经过48小时的连续观察，各浓度都未见试验鱼明显的异常情况
及死亡发生。详见表1、表2。
三、讨论
1.楝皮、青蒿、槟榔本身都是含多种成分的复合体，由于种类、产地、收获季节等不同，其成分含量各不一样，因而运用楝皮、青蒿、槟榔治疗孢子虫病的具体浓度还有待于杀虫成份的提取试验。对于用药时间和用药剂量，主要通过试验试探性地进行研究。并不能完全准确把握应该用哪个浓度。
2.治疗鱼病用渔药的种类很多，其作用各有特点，病害控制需要根据病症合理选择。药物控制疾病本身是一个动态变化的过程。随着药物的使用，机体可能出现相应的改变，如病情好转，说明药物有效；病情无变化，说明药物效果不好或无效；病情恶化，说明用药不当或失误，机体出现新的征兆，则有可能是药物造成。要想控制水产病害，到底选用何种药物？我们应当遵循有效性、安全性、方便性和经济性原则，规范用药，杜绝禁用渔药的使用。
3.试验主要针对药物杀灭孢子虫进行探索，至于环境因子如温度、酸碱度、水中有机物和悬浮物等对药物的影响还需进一步的研究。
4.药材质量不稳定：由于季节、产地、炮制方法等不同，同一种中草药，其有效成份含量差异很大，有时同样的配方疗效却不同。目前还没有科学的手段对中草药的质量进行检测、控制。
5.加工工艺原始：目前中草药的加工大多以原药粉碎或切碎煎熬，其配方多为粗制型产品，剂量使用偏大，适口性也差，不利于规模化生产、推广、应用。同时，中草药在粉碎时，其药粉粒度的大小与其有效成份的释出和动物的吸收有很大关系。应采取先进的生产工艺，对中草药进行提取、精制，使其向微量化、系列化、专用型方向发展。
6.渔用中草药的药效、药理研究薄弱：目前中草药作为渔药，还处于摸索阶段，对有的药物，其有效成份难以确认，治病的药理尚不十分清楚，使用的剂量没有严格的规范标准。应加强对渔用中草药药效、药理的基础研究，制定规范的产品标准和剂量标准，使相关的生产、监察部门有章可循。
7.目前医治鱼类寄生虫病常用的药物有化学药物和中草药。原生动物寄生虫是单细胞低等动物，用硫酸铜、硫酸亚铁、碘、高锰酸钾和甲醛即可杀灭；而大型寄生虫器官分化比较完全，杀死此类寄生虫常用敌百虫、硫双二氯酸等和中草药(苦楝、大蒜、百部、槟榔、南瓜子、苦参、大黄和黄芩等)。化学药物疗效好，但存在药物残留量大和容易产生抗药性等问题，而中草药是一种理想的、环保型天然绿色药物，具有高效、毒副作用小、安全性高、残留少等诸多优点，且来源广、成本低，因此，生产上为了提高疗效，避免产生抗药性和减轻毒副作用，常采用中西药结合的方法。
8.防治上，传统杀虫药物福尔马林、硫酸铜等经过反复试验，对鲫鱼粘孢子虫病防治效果虽然不错，但是具有毒副作用。采用中草药，不仅保证用药的安全性，而且不易产生耐药性。
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