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淡水鱼黏孢子虫病的诊断

发布时间:2015-11-08 01:13:09编辑:水产百科归类:鱼类养殖
   (1)根据症状及流行情况进行初步诊断。

    (2)必须用显微镜进行检查,作出诊断。因有些黏孢子虫不形成肉眼可见的胞囊,仅用肉眼观察就检查不出;同时,即使形成肉眼可见的胞囊,也必须将胞囊压成薄片,用显微镜进行检查,因为形成胞囊的还有微孢子虫、单孢子虫、小瓜虫等多种寄生虫,用肉眼观察无法鉴别。

    (3)作为口岸检疫,是不允许带有被列为检疫对象的病原体(如脑黏体虫)的水产品输出或输入的,所以仅用肉眼观察及取组织压片镜检是远远不够的,极易漏检,所以必须采用以下方法进行检查:

    ①用胃蛋白酶和胰蛋白酶消化鱼的头部,然后用55%葡萄糖溶液离心沉淀后进行镜检。

    ②将组织匀浆后,加生理盐水拌匀,用浮游生物连续沉淀器进行沉淀后再镜检。

    ③将组织匀浆后,加生理盐水拌匀,用100目筛网过滤,滤液再离心10-15分钟,每分钟转l000-1500次;沉淀物反复加生理盐水拌匀离心多次,最后取沉淀物镜检。
    (4)陶增思等(1995)报道,用吉陶单极虫孢子期虫体的可溶性抗原(超声波破碎)分别免疫小鼠和新西兰白兔制备单克隆抗体、多克隆抗体。前者经4次克隆、筛选,共获得4A8、6B8、7B9三株杂交瘤细胞;后者经5次免疫获得高免血清。采用4A8、6B8、7B9三株杂交瘤细胞的小鼠腹水1:1000稀释液,经酶联免疫吸附技术可检出抗原的最低浓度分别为0.14微克/毫升、0.20微克/毫升、0.32微克/毫升,多抗(1:500)为0.43微克/毫升,1:1000混合单抗(4A8:6B8:7B9=1:1:1)为0.11微克/毫升。用间接荧光抗体技术定位显示,单抗、多抗的抗原都位于虫壁。其中4A8的抗原主要位于虫体后部(胚核附近),6B8、7B9的抗原主要位于虫体前部(极囊附近)和极丝。4A8结合的抗原分子量为72KD;多抗结合的抗原分子量分别为58KD、70KD和88KD。这将为早期、准确、快速的诊断提供有力的物质基础。

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